申请(专利)号：CN201710467627.1

申请日：2017.06.20

申请公布号：CN107841469A

公开公告日：2018.03.27

主分类号：C12N1/19(2006.01)I

分类号：C12N1/19(2006.01)I; C12N15/81(2006.01)I; C12N15/66(2006.01)I; C12N15/12(2006.01)I; C12R1/645(2006.01)N;

摘要：本发明公开了一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母的构建方法，包括以下步骤：首先按乳酸克鲁维酵母密码子优化合成的猪小肠抗菌肽PF1基因；将猪小肠抗菌肽PF1基因与乳酸克鲁维酵母质粒pKLAC2同时双酶切反应、琼脂糖凝胶电泳回收，并进行4℃过夜连接，将连接产物转化大肠杆菌JM109，提重组质粒PF1‑pKLAC2；使用限制性内切酶SacII线性化处理重组质粒；再将线性化重组质粒转化乳酸克鲁维酵母GG799,得到重组乳酸克鲁维酵母PF1‑pKLAC2‑GG799。本发明使用乳酸克鲁维酵母对猪小肠抗菌肽PF1进行表达，同时表达产物分泌胞外，降低了后续的分离纯化成本。

申请权利人：江西嘉博生物工程有限公司;

发明设计人：曹远东; 潘烘; 周志; 周华娇; 张燕; 焦贺勋;